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基礎篇-無菌操作基本技術1.實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物...

近看到不少問有關細胞培養(yǎng)污染的事，正好我看到了一個有關這方面的總結，很全很好很強大，跟大家分享下細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結如下:常見的污染如下：1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象！可在培養(yǎng)液...

生物刺激素肯定不是所謂的植物生長調節(jié)劑，植物生長調節(jié)劑也就是俗稱的激素，是指人們根據植物內源激素的原理和功能進行人工合成的化學物質，當然不排除有個別企業(yè)也添加植物生長調節(jié)劑。而真正意義上的生物刺激素主要是天然物質經過提取或是分解得到的產物，對植物具有生理活性的物質，甚至有些可以直接刺激植物內源激素的形成，主要的種類有腐植酸、氨基酸、微生物、甲殼素類、海藻提取物以及其他的一些植物提取物，其中應用廣泛的是氨基酸、腐植酸、海藻提取物這三類。很多壇友會奇怪，氨基酸、腐植酸、海藻提取物...

1、熒光免疫測定技術的概念：將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記，試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后，測定復合物中的熒光素，這種免疫技術，稱為免疫熒光素技術。2、熒光的產生：物質吸收外界能量而進入激發(fā)狀態(tài)，在回復基態(tài)時多余的能量以電磁輻射的形式釋放，即發(fā)光，這種光稱為熒光。這種物質，稱為熒光素。由光激發(fā)所引起的熒光，為光致熒光------熒光免疫技術由化學反應所引起的熒光，為化學熒光------化學發(fā)光技術3、熒光素的熒光特性：⑴停止供能，熒光現象隨即終止⑵對光的吸收和熒光的...

一般我們購買商品化的primaryantibody的時候，抗體的說明書中都會給我們一個推薦的抗體使用濃度。這個濃度在一定程度上來說，是過飽和的，可以滿足大多數實驗的染色需求。但是因為是過飽和的濃度，這就帶來了一定程度的抗體浪費。而過量的抗體，也會大大提高樣本的自發(fā)熒光。從另一個角度來看，因為廠家給出的推薦濃度都是基于一個特定的樣本濃度和樣本體積，所以在一些特殊的實驗中，比如樣本濃度或樣本體積過大的實驗，推薦的濃度就無法達到飽和滴加的要求。在這樣的前提下，推薦實驗用戶針對自己的...

1.實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取...

MEM細胞培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)是實驗室里常見和基本的實驗了，但卻不是簡單的。別小看細胞培養(yǎng)，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態(tài)不好，轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應用廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)...

一、ELISA實驗中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中。2、采血后室溫靜置1小時。3、將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下，可放置保存24-48小時；-20℃下，可放置保存1個月；-70℃下，可放置保存6個月。5、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA測定。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶...