簡要描述:人子宮內膜癌細胞,Ishikawa*原本認為該細胞來源于EnCA101細胞,但后有文獻報道該細胞實際為Ishikawa細胞。
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人子宮內膜癌細胞,Ishikawa*
原本認為該細胞來源于EnCA101細胞,但后有文獻報道該細胞實際為Ishikawa細胞。
細胞名稱:人子宮內膜癌細胞;ECC-1(Ishikawa)
規(guī) 格:T25培養(yǎng)瓶,1×106cells
形態(tài)特征: 上皮細胞樣
生長特性:貼壁描述
原本認為該細胞來源于EnCA101細胞,但后有文獻報道該細胞實際為Ishikawa細胞。
培養(yǎng)條件: RPMI 1640(or MEM) 15%FBS
傳代方法:1:2-1:3傳代,每周換液2-3次。
STR位點信息:
STR Profile AMEL CSF1PO D13S317 D16S539 D5S818 D7S820 TH01 TPOX vWA
ECC-1(Ishikawa) X 11 12 9 12 9 10 11 9 10 9 10 8 14 17
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為2-3代
包裝:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC
貨期:1-2周
使用權限 A類
細胞用途:僅供科研使用。
方 式: 詳詢經(jīng)理
人子宮內膜癌細胞,Ishikawa*
使用權限 A類注意事項:
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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